Por CPR Louisville em 1 de julho de 2014 | 6:06 pm | Imprimir
DESCONHECIDO RELATÓRIO de LABORATÓRIO
Número Desconhecido 105
Michelle Sinovcic
BIO 203: Geral Microbiologia I
Primavera de 2014
INTRODUÇÃO
a Identificação e compreensão de microorganismos é importante por várias razões, sendo que as bactérias são uma das principais causas de doença e enfermidade., Ser capaz de curar mais infecções e doenças pode ser feito por estar bem informado de diferentes microorganismos e como eles trabalham em diferentes ambientes. Este estudo de identificação de bactérias desconhecidas foi feito utilizando várias técnicas utilizadas na classe laboratorial de Microbiologia até este ponto.um tubo de ensaio de caldo contendo bactérias desconhecidas rotuladas com o número 105 foi recebido pelo professor do laboratório de Microbiologia. Uma variedade de procedimentos aprendidos na classe de laboratório de Microbiologia foram realizados na bactéria desconhecida., Estes testes foram realizados como instruído no manual do laboratório de Microbiologia por Mcdonald, Thoele, Salsgiver e Gero (1), a menos que indicado de forma diferente.o primeiro método necessário foi o método quadrant streak. Isto foi feito a fim de isolar as duas bactérias desconhecidas em uma placa de ágar nutriente pelo uso de um laço inoculador, Bunsen queimador, e o caldo. A incubação desta placa à temperatura ambiente foi então realizada a fim de tentar a determinação de duas colônias separadas., O crescimento de uma colônia nesta placa foi então testado para a sua resposta Gram através de etapas de coloração gram usando iodo, violeta de cristal, álcool e safranina, a fim de encontrar um único tipo de bactéria. A observação ao microscópio revelou a resposta gram da bactéria da colónia. Listados na Tabela 1 são os procedimentos tomados, materiais utilizados, temperatura de incubação e seus resultados registrados para a primeira bactéria. Incluídos nestes testes estão o citrato, fermentação de glicose e Lactose, redução de enxofre através de um teste de ferro Kligler, teste de ureia, e teste de vermelho de metila.,foram então tomadas as medidas necessárias para realizar um teste de citrato de Simmon na primeira colónia bacteriana utilizando um ciclo de inoculação esterilizado pela chama de um queimador de Bunsen para colocar o crescimento na inclinação da ágar verde. A incubação desse tubo foi então efectuada durante cinco dias em ambiente de 35 ° C. A determinação do uso de citrato pela bactéria como sua única fonte de carbono foi a razão por trás deste teste.um teste de ferro Kligler foi realizado usando o crescimento da Primeira colônia, a fim de reduzir as opções da possível bactéria, determinando suas capacidades de fermentação para glicose e Lactose., O meio foi esfaqueado por uma agulha de inoculação esterilizada por chama com crescimento bacteriano e incubado a 35°C durante cinco dias.
Um teste de ureia foi o teste seguinte completado nesta Colónia gram-negativa. Isto foi feito mexendo parte da bactéria para o indicador de pH vermelho de fenol e meio de ureia lacete de inoculação esterilizado. Foi então incubado em um ambiente de 35°C por 48 horas. Descobrir se a bactéria poderia produzir ou não um ácido foi o propósito por trás deste teste., Foi também realizado um teste de vermelho de metilo nas bactérias gram-negativas para determinar se a bactéria produzia ou não ácido após a fermentação da glucose. Um ciclo de inoculação esterilizado à chama, com crescimento bacteriano, foi agitado em torno do tubo do meio proteína e glucose MR-VP e incubado a 35°C durante 48 horas. Estes testes foram realizados para confirmar o resultado final da bactéria gram-negativa desconhecida.uma segunda placa de ágar nutriente foi riscada na tentativa de encontrar uma segunda bactéria., O segundo método necessário para isolar a segunda bactéria, especificamente uma bactéria gram-positiva, foi feito utilizando um ciclo de inoculação esterilizado por uma chama do bico de Bunsen para espalhar caldo do tubo original em uma placa de ágar de sal de manitol que foi incubada a 35°C por quatro dias. Depois que nenhum crescimento apareceu um crescimento bacteriano gram-positivo isolado em uma inclinação em um tubo de teste chamado Alt 8 foi então recebido do instrutor de laboratório. Nessa altura, foram realizados testes., Listados no quadro 2 são os testes realizados, os materiais utilizados, a temperatura de incubação e os seus resultados registados para a segunda bactéria. Foram realizados testes de caseína e um teste de Matlose.
o primeiro procedimento necessário para este crescimento foi uma mancha de grama. Violeta cristal, iodo, álcool e safranina foram usados. A resposta gram da bactéria foi testada para reduzir as escolhas para o que este Desconhecido pode ser.
um teste de caseína foi o procedimento seguinte realizado na bactéria gram-positiva para determinar se a bactéria podia produzir a enzima casease., Um circuito de inoculação foi esterilizado por chama, coberto com algum crescimento bacteriano, e espalhado em uma placa de ágar de leite. A incubação desta placa foi feita em um ambiente de 35°C por cinco dias.
um teste de maltose foi o próximo método utilizado para confirmar a identidade da bactéria desconhecida. Determinaria se a bactéria poderia ou não produzir ácido a partir da fermentação de maltose. Um ciclo de inoculação esterilizado por chama com crescimento bacteriano foi agitado em torno do meio. O tubo foi então incubado a 35 ° C durante cinco dias.,os resultados incluídos na Tabela 1 são os testes realizados, os materiais utilizados, As temperaturas de incubação, e os resultados da bactéria gram-negativa, a Tabela 2 mostra estes resultados para o Gram-positivo. Incluídos no fluxograma 1 são os testes e seus resultados para a bactéria gram-negativo, Flowchart 2 mostra estes para o gram-positivo.,d=”5fa084a25a”>Maltose teste
DISCUSSÃO / CONCLUSÃO
A vários testes de laboratório de microbiologia classe manual que foram executadas em ambos os gram-negativas e gram-positivas, bactérias são o que o levou a suas identidades., O primeiro passo foi isolar a bactéria do caldo original # 105 em duas colônias separadas usando o método quadrant streak em uma placa de ágar nutriente.
Depois de deixar a primeira placa de série incubar à temperatura ambiente durante cinco dias houve crescimento nas duas primeiras riscas, mas as duas últimas não tiveram nenhuma. Este crescimento consistia apenas de uma colônia distinta, um segundo não estava presente. Isto então levou à coloração de gram dessa Colônia, uma segunda placa streak em ágar nutriente em uma tentativa de crescer a segunda colônia necessária, e o uso de uma placa de ágar sal de manitol.,ao observar a lâmina Gram manchada da primeira colónia sob o microscópio, observou-se cocobacilli cor-de-rosa. Ver estas barras quase redondas provou que esta era uma colónia bacteriana gram-negativa. Sendo que todas as opções gram-negativo eram varas, isso não restringiu nenhuma das possibilidades.sabendo que a bactéria gram-negativa cresceu, o método quadrante streak foi usado novamente em uma placa de ágar nutriente, na esperança de crescer também a bactéria gram-positiva., Também usando o caldo do tubo # 105, uma placa de ágar de sal de manitol foi revestida sendo que seleciona para o crescimento bacteriano gram-positivo. Ao verificar os resultados após a incubação, não houve crescimento nesta placa, e ainda Nenhuma segunda colônia distinta. Foi então administrada uma bactéria gram-positiva isolada chamada Alt 108.
o primeiro teste feito na colónia gram-negativa foi um teste de citrato usando uma inclinação da ágar Citrato de Simmon verde inoculada por colocar o crescimento na parte superior da inclinação. Após a incubação, a inclinação virou uma cor Azul, resultando em um teste positivo., Isto mostrou que a bactéria usa citrato como sua fonte primária de carbono. Isto também excluiu Escherichia coli como uma possibilidade para a minha bactéria gram-negativo. O próximo teste foi o teste de ferro Kligler.o teste de Ferro de Kligler consistiu em esfaquear uma inclinação para testar a redução de enxofre, fermentação de glicose e fermentação de lactose. Depois de incubar, o topo da inclinação tinha virado uma cor vermelha e o fundo era amarelo. Estes resultados mostraram um resultado negativo para sulfeto de hidrogênio uma vez que não havia preto no tubo, o que significava Proteus vulgaris não era mais uma opção., A cor vermelha e o fundo amarelo mostraram a fermentação positiva da glicose que excluiu Pseudomonas aeruginosa. Proteus vulgaris e Pseudomonas aeuginosa foram excluídos pelo resultado negativo da lactose. O próximo método utilizado foi um teste de ureia.este ensaio consistiu em agitar o crescimento bacteriano num tubo de vermelho de fenol e ureia para testar a presença de ácido. Após a incubação, o caldo ainda era de cor amarela, dando um resultado negativo. Isto confirmou que o Enterobacter aerogenes era a bactéria gram-negativa. Um teste de vermelho de metilo também foi realizado para confirmar esta resposta.,
o crescimento bacteriano foi misturado no Mr-VP e no caldo proteico, a fim de determinar se o ácido poderia ser produzido como resultado da fermentação da glucose. Após a incubação, o caldo era de cor amarela, um resultado negativo. Isto também confirmou que a bactéria desconhecida era Enterobacter aerogenes.o primeiro teste feito no crescimento gram-positivo foi uma mancha gram. Depois de fazer o procedimento envolvendo violeta de cristal, iodo, álcool e safranina, e ver a lâmina sob o microscópio, varas roxas foram vistas., A forma das varas reduziu as opções para Bacillus cereus e Bacillus subtilis. O próximo teste realizado neste crescimento foi um teste de caseína.o crescimento bacteriano foi espalhado numa placa de ágar do leite para ver se a bactéria produz casease e decompõe a caseína. Após a incubação, a placa tinha crescimento branco sobre ela, dando um resultado negativo. Este resultado negativo permitiu excluir a opção de Bacillus cereus. Isto significava a confirmação de que a bactéria gram-positiva era Bacillus subtilis. A fim de obter uma segunda confirmação, foi realizado um teste de maltose.,o crescimento bacteriano foi misturado num tubo contendo um meio de maltose vermelho para testar a presença de ácido em resultado da fermentação de maltose. Após a incubação, o líquido era de cor amarela, dando um resultado positivo para a produção de ácido. Este resultado confirmou que a bactéria era Bacillus cereus. Este foi um resultado oposto ao que o teste de caseína tinha mostrado.
Depois de falar com o professor de laboratório sobre os resultados, o teste de caseína foi confirmado como tendo resultados reais. A bactéria gram-positiva desconhecida foi considerada Bacillus cereus e a gram-negativa Enterobacter aerogenes.,
Enterobacter aerogenes é frequentemente visto como a causa de infecções do tracto respiratório inferior, infecções da pele e dos tecidos moles, infecções do tracto urinário (UTIs), endocardite, infecções intra-abdominais, artrite séptica, osteomielite, infecções do SNC e infecções oftálmicas. (2) um problema com infecções Enterobacter é que muitas vezes não podem ser diferenciadas de outras infecções bacterianas agudas.a terapêutica antimocribal com um agente único é normalmente utilizada nos casos de infecções Enterobacter., (3) As Beta-lactamas, os Aminoglicosidos, as Fluroquinolonas e a Tritomprim-sulfametoxazona (TMP-SMZ) são todos os antibióticos utilizados regularmente para tratar este tipo de infecções. (2) um problema com isso é que quando se obtém demasiada exposição a esses medicamentos resistência é muitas vezes desenvolvido, o que tem mostrado atualmente um grande problema com essas infecções. Devido a estas resistências, combinar antibióticos com diferentes estruturas é agora usado como um tratamento para as infecções, terapia de combinação.Mcdonald, Victoria, Mary Thoele, Bill Salsgiver, e Susie Gero. Manual de laboratório de Microbiologia Geral., N. p.: n. p., 2011. Imprimir.