single-chain variable fragmentti (scFv) on fuusio proteiini muuttujan aluetta raskas – (VH) ja valo ketjut (VL) immunoglobuliinit, liitetty lyhyt linker peptidi kymmenen noin 25 aminohappoja. Linkkerissä on yleensä runsaasti glysiiniä joustavuuden vuoksi sekä seriiniä tai treoniinia liukoisuuden vuoksi, ja se voi joko yhdistää VH: n N N-Terminuksen VL: n C-terminukseen tai päinvastoin., Tämä proteiini säilyttää alkuperäisen immunoglobuliinin spesifisyyden huolimatta vakioalueiden poistamisesta ja linkkerin käyttöönotosta.
nämä molekyylit luotiin helpottamaan Fagin näyttämistä , jossa antigeenia sitova domeeni on erittäin kätevä ilmaista yhtenä peptidinä. Vaihtoehtoisesti scFv voidaan luoda suoraan hybridomasta johdetuista alaluokista raskaista ja kevyistä ketjuista. Scfv: llä on monia käyttötarkoituksia, kuten virtaussytometria, immunohistokemia ja keinotekoisten t-solureseptorien antigeenisidosalueina.,
toisin kuin monoklonaaliset vasta-aineet, joita tuotetaan usein nisäkkäiden soluviljelmissä, scfv: t tuotetaan useammin bakteerisoluviljelmissä, kuten E. coli
fragmentti antigeeni-sitoutuminen (Fab-fragmentti) on antigeeneihin sitoutuvan vasta-aineen alue. Se koostuu yhden vakio-ja yhden muuttujan toimialueen jokaisen raskaan ja kevyen ketjun. Nämä verkkotunnukset muoto paratope — antigen-binding site — amino terminal lopussa monomeeri. Nämä kaksi muuttuvaa verkkotunnusta sitovat epitopen spesifisiin antigeeneihinsä.,
kokeellisessa ympäristössä laboratoriossa voidaan tuottaa Fc-ja Fab-fragmentteja. Entsyymi papaiini voidaan käyttää cleave immunoglobuliini monomeerin kahteen Fab-fragmentit ja Fc fragmentti. Entsyymi pepsiini pilkkoo saranan alueen alapuolella, joten muodostuu F (ab’)2-fragmentti ja pFc’ – fragmentti. F(ab’)2-fragmentti voidaan jakaa kahteen Fab’ – fragmenttiin lievällä pelkistyksellä.,
raskaiden ja kevyiden ketjujen vaihtuvat alueet voidaan fuusioida yhteen muodostaen yksiketjuisen muuttujan fragmentti (scFv), joka on vain puolet Fab-fragmentin koosta, mutta säilyttää kuitenkin vanhemman immunoglobuliinin alkuperäisen spesifisyyden.
diabody on kaksi scfv: tä, joilla on yhteys linker-peptideihin, jotka ovat liian lyhyitä, jotta nämä kaksi muuttuvaa aluetta taitetaan yhteen (noin viisi aminohappoa), mikä pakottaa scfv: t dimerisoitumaan. Diabodies on osoitettu dissosiaatiovakiot jopa 40-kertaisesti pienempi kuin vastaava scFvs, mikä tarkoittaa, että heillä on paljon suurempi affiniteetti niiden kohde.,
kaksi scFv: tä (jotka sitoutuvat samoihin tai eri antigeeneihin) voidaan liittää myös pidempiin linkkereihin, kuten leusiinin vetoketjuihin.