CPR Louisville heinäkuun 1, 2014 | 6:06 pm | Tulosta
TUNTEMATON LAB RAPORTTI
Tuntematon Numero 105
Michelle Sinovcic
BIO 203: Yleinen Mikrobiologia I
Kevät 2014
JOHDANTO
Tunnistaa ja ymmärtää mikro-organismeja, on tärkeää useita syistä on se, että bakteerit ovat merkittävä syy ihmisen sairaus ja sairaus., Se, että pystyy parantamaan useampia infektioita ja sairauksia, voidaan tehdä olemalla hyvin perillä erilaisista mikro-organismeista ja siitä, miten ne toimivat eri ympäristöissä. Tämä tutkimus tuntemattomien bakteerien tunnistamiseksi tehtiin käyttämällä erilaisia mikrobiologisessa laboratorioluokassa tähän asti käytettyjä tekniikoita.
MATERIAALIT JA MENETELMÄT
koeputkeen liemi, joka sisältää tuntemattomia bakteereja merkitty numero 105 saatiin mikrobiologian laboratorion professori. Tuntemattomille bakteereille tehtiin erilaisia mikrobiologian laboratorioluokassa opittuja toimenpiteitä., Nämä testit suoritettiin McDonald, Thoele, Salsgiver ja Gero (1) microbiology course lab-käsikirjan ohjeiden mukaisesti, ellei toisin mainita.
ensimmäinen tarvittava menetelmä oli quadrant streak-menetelmä. Tämä tehtiin kahden tuntemattoman bakteerin eristämiseksi ravintoagaarilevyllä rokottavan silmukan, Bunsenpolttimen ja liemen avulla. Tämän levyn inkubointi huoneenlämmössä suoritettiin tämän jälkeen kahden erillisen pesäkkeensä määrittämiseksi., Kasvun siirtomaa tämä levy oli sitten testata sen Gramma vastaus läpi vaiheet gram-värjäys käyttäen jodia, crystal violetti, alkoholi, ja safranin jotta löytää yhden tyyppinen bakteeri. Mikroskoopilla tehty havainto palautti bakteerin gramvasteen siirtokunnasta. Taulukossa 1 luetellaan menetelmät, käytetyt materiaalit, inkubaatiolämpötila ja niiden kirjatut tulokset ensimmäisestä bakteerista. Sisältyvät nämä testit ovat Sitraatti, Glukoosi ja Laktoosi käyminen, rikin vähentämisen kautta Kligler Rauta-testi, Urea testi, ja Metyyli-Punainen testi.,
Tarvittavat toimenpiteet vietiin suorittaa Simmon n Citrate test ensimmäisellä bakteeri siirtomaa käyttäen puhkeavan silmukka steriloitu liekki Bunsen poltin laittaa kasvu vihreä agar näkökulma. Tämän jälkeen putkea inkuboitiin viisi päivää 35 ° C: n lämpötilassa. Testin syynä oli se, että bakteeri käytti sitraattia ainoana hiilenlähteenään.
Kligler-rautakoe tehtiin ensimmäisestä pesäkkeestä saadulla kasvulla mahdollisen bakteerin vaihtoehtojen rajaamiseksi määrittämällä sen käymisominaisuudet glukoosille ja laktoosille., Väliainetta puukotettiin liekkisertifioidulla neulalla, jossa oli bakteerikasvua ja jota inkuboitiin 35°C: ssa viisi päivää.
Ureatesti oli seuraava tälle gramnegatiiviselle yhdyskunnalle suoritettu testi. Tämä tehtiin sekoittamalla osa bakteerista pH-indikaattoriin fenolipunaista ja ureapintaista liekkiä steriloitua inokulaatiosilmukkaa. Sen jälkeen sitä inkuboitiin 35°C: ssa 48 tuntia. Testin tarkoituksena oli selvittää, voiko bakteeri tuottaa happoa vai ei., Gramnegatiivisille bakteereille tehtiin myös Metyylipunatesti sen selvittämiseksi, tuottiko bakteeri happoa glukoosin käymisen jälkeen. Liekki steriloitu inokuloiva silmukka, jossa on bakteerikasvua, sekoitettiin proteiinin ja glukoosin MR-VP-väliaineen putken ympärille ja inkuboitiin 35°C: ssa neljäkymmentä kahdeksan tuntia. Nämä testit tehtiin vahvistaakseen tuntemattoman gramnegatiivisen bakteerin lopullisen tuloksen.
toinen ravintoaineagaarilevy striimattiin yrittäessään löytää toisen bakteerin., Toinen menetelmä, jota eristää toisen bakteerin, erityisesti gram-positiivinen bakteeri, joka oli tehty käyttämällä puhkeavan silmukka steriloitu, jonka polttimen liekki levitä liemi alkuperäisen putken päälle mannitoli suolaa agar levy, joka oli inkuboidaan 35°C: ssa neljä vuorokautta. Kun ei kasvua ilmestyi eristetty grampositiivinen bakteerikasvu slant koeputkessa merkitty Alt 8 sitten saatiin lab ohjaaja. Tämän jälkeen sille tehtiin testejä., Taulukossa 2 luetellaan suoritetut testit, käytetyt materiaalit, inkubaatiolämpötila ja niiden kirjatut tulokset toiselle bakteerille. Kaseiinitesti ja Matloosatesti tehtiin.
ensimmäinen tähän kasvuun vaadittu toimenpide oli grammatahra. Käytössä olivat kristallivioletti, jodi, alkoholi ja safraniini. Bakteerin gram-vaste testattiin rajaamaan valintoja siihen, mitä tämä tuntematon voi olla.
kaseiini testi oli seuraava menettely suoritetaan gram-positiivinen bakteeri, onko bakteeri voi tuottaa entsyymiä casease., On vasenkätinen silmukka oli liekki steriloida, peitetty joitakin bakteerien kasvua, ja levitä päälle maito-agarmaljalla. Tämä levy inkuboitiin 35°C: ssa viiden päivän ajan.
maltoositesti oli seuraava menetelmä, jota käytettiin tuntemattoman bakteerin tunnistamiseksi. Se selvittäisi, voiko bakteeri tuottaa happoa maltoosikäymisestä. Väliaineen ympärille sekoitettiin liekki steriloitu, bakteerikasvustolla rokotettava silmukka. Sen jälkeen putkea inkuboitiin 35°C: ssa viisi päivää.,
TULOKSIA
Mukana Taulukossa 1 ovat testien, materiaalien käyttö, lämpötilat inkubaation, ja tulokset gram-negatiivinen bakteeri, Taulukko 2 osoittaa, nämä gram-positiivisia. Sisältyvät Vuokaavio 1 testit ja niiden tulokset gram-negatiivinen bakteeri, Kaavio 2 osoittaa, nämä gram-positiivisia.,d=”5fa084a25a”>Maltoositesti
vaihtui väriltään punaisesta keltaiseksi
keskustelu / päätelmä
mikrobiologian laboratorioluokan käsikirjan eri testit, jotka tehtiin sekä gramnegatiivisille että grampositiivisille bakteereille, johtivat niiden identiteettiin., Ensimmäinen askel oli bakteerin eristäminen alkuperäisestä liemestä #105 kahdeksi erilliseksi pesäkkeeksi käyttäen ravinneagaarilevyllä olevaa kvadranttivirtamenetelmää.
Kun kerroit ensimmäinen putki levy inkuboidaan huoneenlämmössä viisi päivää oli kasvua kaksi ensimmäistä raitoja, mutta kaksi viimeistä ei ollut mitään. Tämä kasvu koostui vain yhdestä erillisestä siirtokunnasta, toista ei ollut. Tämä sitten johti siihen, että gram-värjäys, että siirtomaa, toinen putki levy ravinteiden agar yrittää kasvattaa tarvitaan toinen siirtomaa, ja käyttää Mannitolia Suolaa agarmaljalla.,
kun tarkkailtiin ensimmäisen siirtokunnan gram-värjättyä liukumäkeä mikroskoopilla pink cocobacilli nähtiin. Näiden lähes pyöreiden sauvojen näkeminen todisti, että kyseessä oli gramnegatiivinen bakteeriyhdyskunta. Koska kaikki gram-negatiiviset vaihtoehdot olivat sauvoja, tämä ei kaventanut mitään mahdollisuuksia.
Tietäen, että gram-negatiivinen bakteeri kasvoi, quadrant putki menetelmää käytettiin jälleen nutrient agar levy toiveita kasvaa gram-positiivinen bakteeri, samoin., Myös #105-putken lientä käyttäen pinnoitettiin Mannitolisuola-Agar-levy, jonka se valitsee grampositiiviseen bakteerikasvustoon. Kun tuloksia tutkittiin haudonnan jälkeen, tällä lautasella ei ollut kasvua, eikä vieläkään toista erillistä pesäkettä. Tämän jälkeen annettiin yksittäinen grampositiivinen bakteeri, jonka nimi oli Alt 108.
ensimmäinen gramnegatiiviselle pesäkkeelle tehty testi oli sitraattitesti, jossa käytettiin vihreää simmonin Sitraattiagaria, joka inokuloitiin panemalla kasvu viiston päälle. Haudonnan jälkeen viisto oli muuttunut siniseksi, mikä johti positiiviseen testiin., Tämä osoitti, että bakteeri käyttää sitraattia ensisijaisena hiilenlähteenään. Tämä sulki pois myös Escherichia colin mahdollisuuden gramnegatiiviselle bakteerilleni. Seuraava testi oli Kliglerin rautakoe.
Kligler Rauta testi koostui puukotus näkökulma, jotta voidaan testata vähentää rikin, käymisen glukoosia, ja käymisen laktoosia. Hautomisen jälkeen viiston yläosa oli muuttunut punaiseksi ja alaosa oli keltainen. Nämä tulokset osoittivat, että negatiivinen tulos rikkivetyä, koska siellä oli musta putki, joka tarkoitti sitä, Proteus vulgaris ollut enää vaihtoehto., Punainen väri ja keltainen pohja osoittivat molemmat positiivista glukoosikäymistä, joka sulki pois Pseudomonas aeruginosan. Sekä Proteus vulgaris että Pseudomonas aeuginosa suljettiin pois negatiivisesta laktoosituloksesta. Seuraava käytetty menetelmä oli Ureatesti.
Tämä testi koostui bakteerien kasvun sekoittamisesta fenolipunaiseen ja ureaputkeen hapon esiintymisen testaamiseksi. Haudonnan jälkeen liemi oli vielä keltainen väri, mikä antoi negatiivisen tuloksen. Tämä vahvisti, että Enterobacter aerogenes oli gramnegatiivinen bakteeri. Tämän vastauksen vahvistamiseksi tehtiin myös Metyylipunatesti.,
bakteerien kasvua sekoitettiin MR-VP: hen ja proteiiniliemeen sen selvittämiseksi, voisiko happoa tuottaa glukoosikäymisen seurauksena. Haudonnan jälkeen liemi oli keltainen väri; negatiivinen tulos. Tämä vahvisti myös sen, että tuntematon bakteeri oli Enterobacter aerogenes.
grampositiivisen kasvun ensimmäinen testi oli grammatahra. Kun teet menettely, johon liittyy crystal violetti, jodi, alkoholi, ja safranin, ja katsella dia mikroskoopilla, violetti tangot olivat nähneet., Muoto on tangot kavensi vaihtoehtoja Bacillus cereus ja Bacillus subtilis. Seuraava tälle kasvulle tehty testi oli kaseiinitesti.
bakteerikasvu levisi maitoagarilevylle, jotta voitiin selvittää, tuottiko bakteeri kaseiinia ja hajottiko se kaseiinia. Haudonnan jälkeen lautasella oli valkoista kasvua, mikä antoi negatiivisen tuloksen. Tämä negatiivinen tulos mahdollisti Bacillus cereus-vaihtoehdon poissulkemisen. Tämä merkitsi vahvistusta sille, että grampositiivinen bakteeri oli Bacillus subtilis. Toisen vahvistuksen saamiseksi tehtiin maltoositesti.,
Bakteerien kasvua sekoitettiin putkeen, joka sisältää punainen maltoosi keskipitkän testata happo seurauksena maltoosi käyminen. Inkubaation jälkeen neste oli keltaista väriä, mikä antoi positiivisen tuloksen hapontuotannolle. Tämä tulos vahvisti bakteerin olevan Bacillus cereus. Tulos oli päinvastainen kuin kaseiinitesti oli osoittanut.
Kun puhuu laboratorion professori tuloksista, kaseiini-testi vahvisti olevan totta tuloksia. Tuntemattoman grampositiivisen bakteerin todettiin olevan Bacillus cereus ja gramnegatiivisen Enterobacter aerogenes.,
Enterobacter aerogenesin katsotaan yleisesti aiheuttavan alahengitystieinfektioita, iho-ja pehmytkudosinfektioita, virtsatieinfektioita (UTIs), endokardiittia, vatsansisäisiä infektioita, septistä niveltulehdusta, osteomyeliittiä, KESKUSHERMOSTOTULEHDUKSIA ja silmätulehduksia. (2) Yksi enterobakteeri-infektioiden ongelma on, että niitä ei useinkaan voida erottaa muista akuuteista bakteeri-infektioista.
antimokribaalilääkitystä käytetään tyypillisesti enterobakteeri-infektioissa., (3) Beetalaktaamit, aminoglykosidit, Flurokinolonit ja Trithomprim-sulfametoksatsoni (TMP-SMZ) ovat kaikki antibiootteja, joita käytetään säännöllisesti tämäntyyppisten infektioiden hoitoon. (2) ongelma tämä on, että kun saada liikaa altistumista näille lääkkeille kehittyy usein resistenssi, joka on tällä hetkellä osoittanut suuri ongelma näiden infektioiden. Näiden vastoinkäymisten vuoksi antibioottien ja eri rakenteiden yhdistämistä käytetään nyt infektioiden hoitona, yhdistelmähoitona.
Mcdonald’, Victoria, Mary Thoele, Bill Salsgiver, ja Susie Gero. Laboratorion käsikirja yleisen mikrobiologian., NP. NP., 2011. Tulostaa.