antagonismia penisilliinin ja erytromysiinin välillä Streptococcus pneumoniae-bakteeria vastaan in vitro ja In vivo

Abstrakti

β-laktaamiantibioottien ja makrolidien yhdistelmää suositellaan usein akuutin keuhkokuumeen empiiriseen ensihoitoon, jotta saadaan tehoa tärkeimpiä taudinaiheuttajia vastaan. Teoriassa tämä yhdistelmä voi olla epätarkoituksenmukainen, sillä bakteriostaattinen aine saattaa estää bakterisidisen aineen vaikutuksen., Tässä tutkimuksessa mahdollista vuorovaikutusta penisilliini ja erytromysiini tutkittiin in vitro ja in vivo vastaan neljä kliinisiä isolaatteja Streptococcus pneumoniae, jossa Mikrofonit penisilliini vaihtelevat 0.016 0,5 mg/L ja erytromysiini 0,25 – >128 mg/L. In vitro-aika–tappaa käyrät on luotu, joilla on kliinisesti merkittävinä pitoisuuksina penisilliini (10 mg/L) ja erytromysiini (1 mg/L), joko yhdessä tai erikseen. Penisilliinin ja erytromysiinin välistä antagonismia havaittiin neljällä isolaatilla., In vivo yhteisvaikutuksia tutkittiin hiiren vatsakalvontulehdusmallissa. Vatsakalvonsisäisen rokotuksen jälkeen penisilliini ja erytromysiini annettiin joko yksittäin tai yhdistelmänä. Kahden neljästä isolaatista kuolleisuus oli merkitsevästi suurempi penisilliinin ja erytromysiinin yhdistelmähoitoa saaneissa ryhmissä kuin pelkällä penisilliinillä hoidetuissa ryhmissä . Hiiren peritoniittimallin avulla In vivo time-kill-käyrät osoittivat, että tutkittavan isolaatin erytromysiinin ja penisilliinin välillä oli antagonismia., Penisilliinin ja erytromysiinin välillä in vitro ja In vivo osoitettu antagonismi viittaa siihen, että β-laktaamiantibiootteja ja makrolideja ei pidä antaa yhdessä, ellei pneumokokki-infektiota voida sulkea pois.

Johdanto

on haastavaa valita oikea hoito keuhkokuumepotilaille, koska etiologiaa ei voida ennustaa pelkästään oireiden ja kliinisten löydösten perusteella, eikä lopullista mikrobiologista diagnoosia yleensä ole vahvistettu ennen hoidon aloittamista., Streptococcus pneumoniae on yleisimmin eristetty organismi yhteisön hankkimassa keuhkokuumeessa, erityisesti pienillä lapsilla ja vanhemmilla potilailla, ja infektioon liittyy edelleen korkea kuolleisuus.1 Mycoplasma pneumoniae -, Chlamydia pneumoniae-ja Legionella spp-infektiot myös common2,3 ja nämä organismit ovat yleensä ole herkkä mikrobilääkkeille yleisesti käytetty hoitoon pneumokokki. Siksi penisilliiniä tai muita β-laktaameja suositellaan usein yhdessä erytromysiinin kanssa akuutin, tuntemattoman atetiologisen keuhkokuumeen empiiriseen hoitoon.,4

aiemmin β-laktaamiantibioottien, kuten penisilliinin, ampisilliinin, piperasilliinin ja kefuroksiimin, in vitro ja In vivo-synergian on osoitettu yhdistettynä gentamisiiniin S. pneumoniae-valmistetta vastaan.5,6 Antagonismia in vitro on osoitettu yhdistelmiä, kuten ampisilliini-ja kloramfenikolia vastaan Haemophilus influenzae7 ja vastaan B-ryhmän streptokokit.,8 Kliinisesti tärkeää vihamielisyys on raportoitu välillä, penisilliini ja tetrasykliini vastaan pneumokokki,9,10 penisilliini ja erytromysiini vastaan ryhmä streptococci11 ja ampisilliini, streptomysiini ja kloramfenikoli akuutti bakteeriperäinen aivokalvontulehdus.12 teoreettisesti pneumokokin empiirinen alkuhoito β-laktaamiaineen ja makrolidin yhdistelmällä voi olla myös pneumokokki-infektion tapauksessa epätarkoituksenmukainen, sillä bakteriostaattinen makrolidi saattaa estää β-laktaamin bakterisidisen vaikutuksen.,

tässä tutkimuksessa selvitimme penisilliinin ja erytromysiinin mahdollista yhteisvaikutusta in vitro neljää kliinistä pneumokokin isolaattia vastaan, joilla oli erilaisia alttiuksia penisilliinille ja erytromysiinille.6,13 tutkimme interaktioita in vivo hiiren peritoniittimallissa.6

Materiaalit ja menetelmät

Bakteerit, media ja kasvun edellytykset hiiri peritoniitti malli

Bakteeri keskeytykset voidaan käyttää saatuja inokulaatteja in vitro-ja in vivo-testeissä valmistettiin tuoreista yön yli kulttuureissa 5% verimaljalla levyt valmistettu jäädytetty varastossa kulttuureissa., Inokulaatti hiiren kokeissa oli valmis välittömästi ennen inokulointia keskeyttämällä siirtomaat steriili Mueller–Hinton-lientä (Statens Serum Institut, Kööpenhamina, Tanska) ja säädettiin optinen tiheys aallonpituudella 540 nm 0,5–1.0, jolloin pitoisuus c. 108 pmy/mL, kuten aiemmin on kuvattu.13 kunkin kokeen koko ymppi oli päättänyt sen jälkeen tehdä 10-kertainen laimennoksilla Mueller–Hinton-lientä, joista 20 µL oli päällystetty kahdella 5% verimaljalla levyt paikkoja päällekkäisiä, minkä jälkeen laskemalla pesäkkeiden yön yli inkuboinnin jälkeen 35°C ilmaa., Mucin (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA), joka on sikojen vatsasta saatava entsyymiuute, käytettiin hiirten rokottamisen adjuvanttina ja sitä valmistettiin kantaliuoksena 10% (W/v) suolaliuoksessa.13 juuri ennen rokottamista mucin-liuokset laimennettiin 1: 1 pneumokokkisuspensioilla, jolloin lopullinen mucin-pitoisuus oli 5% (w/v).

käytetyt lääkkeet olivat penisilliini G (Leo Pharmaceutical Co., Ballerup, Tanska) ja erytromysiini (Sigma Chemical Co.). G-penisilliini laimennettiin fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella pH 6,5 ± 0.,1, ja erytromysiini laimennettiin 9 mL: aan steriiliä vettä ja 1 mL: aan 96% alkoholia; pH erytromysiini ratkaisu oli säätää välillä 6,7-7,3.

MICs ja MBCs

MICs määritettiin lasiputkien liemimakrodiluutiomenetelmällä. Kaikki testit tehtiin kahtena kappaleena ja tulokset luettiin 20 tunnin inkuboinnin jälkeen 35°C: ssa.lasiputkissa käytettävä liemen makrodiluutiomenetelmä suoritettiin Mueller–Hinton-liemellä (Statens Serum Institut), johon lisättiin 5% lampaanverta; käytettiin 106 pmy/mL: n inokulaattia., G-penisilliini laimennettiin kahteen kertaan Mueller–Hinton-liemessä, jolloin sen pitoisuudet olivat 0,004-64 mg/l. Käytimme S. pneumoniae ATCC 49619, kuten ohjaus-kannan MIC-testit.

MBC määritettiin putkien alakulttuurilla, jossa ei ollut näkyvää kasvua MIC-määrityksen jälkeen. Jokaisesta putkesta viljeltiin 100 µL penisillinaasia sisältävillä agar-levyillä (Leo Pharmaceutical Co.) 1000 IU/levy ja pesäkkeet laskettiin 18-24 tunnin inkubaation jälkeen 35°C: ssa., MBC määriteltiin pienimmäksi penisilliinipitoisuudeksi, joka vähensi siirrosainetta ≥99,9%. Kaikki määritykset suoritettiin kahtena kappaleena.

Aika–tappaa käyrät

tutkia mahdollisia yhteisvaikutuksia penisilliini ja erytromysiini, aika–tappaa kokeita tehtiin kliinisesti merkityksellisiä penisilliini ja erytromysiini pitoisuudet 10 ja 1 mg/L, vastaavasti., Ennen aikatappokokeita isolaatti 86 (erytromysiinille resistentti) kasvatettiin 5%: lla veren agar-levyistä, jotka sisälsivät erytromysiiniä 4 mg/L (erytromysiiniresistenssin induktio), ja levyillä, joissa ei ollut erytromysiiniä (erytromysiiniresistenssin induktio ei indusoinut). Pneumokokkeja (106 pmy/mL) inkuboitiin 20 mL: ssa Mueller–Hinton-lientä 35°C: ssa ravistamalla. Bakteerien eksponentiaalisen kasvun varmistamiseksi antibiootteja lisättiin ensimmäisen kerran 1 tunnin inkubaation jälkeen. Näytteet otettiin ennen antibioottien lisäämistä ja 1, 2, 3 ja 5 tuntia myöhemmin., Aikatappokäyriä ei jatkettu pidemmälle, sillä kaikille isolaateille alkoi tapahtua autolyysiä 5-6 tunnin kuluttua. Pmy/mL: n määrä määritettiin sopivien laimennosten jälkeen, ja 100 µL levitettiin 5%: iin veren agar-levyistä. Laimentamattomissa näytteissä käytettiin (kuten edellä) penisillinaasia sisältäviä agar-levyjä. Pesäkkeet laskettiin 20 tunnin inkubaation jälkeen 35°C: ssa.kaikki aikatappokokeet tehtiin kahtena kappaleena. Toistuvien kokeiden siirtomäärien vaihtelu samaan aikaan oli <0,5 log10 / mL., Antagonismi määriteltiin penisilliinin ja erytromysiinin yhdistelmän merkitsevästi vähentyneeksi tappovaikutukseksi (eli >0, 5 log10 pmy/mL 1-5 tunnin kuluttua lääkkeiden lisäämisestä) verrattuna pelkkään penisilliiniin.14

aika–tappaa kokeiluja, mittasimme mahdollisia pH-muutoksia pullot, joiden pH testi nauhat (pH 4.5–10.0; valmistui vuonna 0,5 pH-yksikköä, Sigma Chemical Co.).

eläinkokeet (hiiren peritoniittimalli)

kaikki eläinkokeet hyväksyttiin Tanskan kansallisessa eläineettisessä komiteassa., Outbred naaras ssc CF-1 hiiret (Statens Serum Institut) Ikä 8-12 viikkoa, paino 28-30 g käytettiin, ryhmissä viisi-36 hiirtä. Kaiken kaikkiaan käytimme 88 hiirillä eristää 73, 89 hiirillä eristää 75, 88 hiirillä eristää 86 (ilman induktio), 94 hiirillä eristää 86 (indusoida erytromysiinin kuin aika–tappaa tutkimukset) ja 89 hiirillä eristää 93. Hiiriä pidettiin häkeissä, joissa oli viidestä seitsemään hiirtä häkissä; niille annettiin vapaa pääsy ruokaan ja veteen. Pneumokokkisuspensio (0,5 mL) rokotettiin vatsaonteloon 25 g: n ruiskulla., Siirrosaine sisälsi 106 pmy/mL ja 5% (w/v) Mueller–Hinton-liemessä olevaa muinia. Tällaisen rokotteen avulla hoitamattomilla hiirillä kuolleisuus on c. 100%, joka menehtyy 36-48 h rokotuksen jälkeen. Antibiootteja annettiin ihon alle kaulan alueelle tilavuutena 0,25 mL annosta kohti.Erytromysiini annettiin 90 min bakteerirokotteen jälkeen ja yhdistelmäryhmässä erytromysiiniä annettiin 90 min bakteerirokotteen ja penisilliinin jälkeen 60 min myöhemmin. Penisilliiniä annettiin yksinään 150 min bakteerirokotteen jälkeen., Verrokkihiirille annettiin steriiliä suolaliuosta 90 min bakteerirokotuksen jälkeen.

– Annoksia penisilliini ja erytromysiini valittiin mukaan Hill yhtälö sigmoid annos–vaikutus-käyriä, siten, että penisilliini yksin olisi tarkoitus johtaa c. 95% survival, kun erytromysiini yksin oli odotettavissa estää kuolleisuus 10% hiiret. Isolaatti 73-tartunnan saaneita hiiriä hoidettiin penisilliinillä 10 mg / hiiri ja/tai erytromysiinillä 100 µg / hiiri. Isolaatti 75-tartunnan saaneita hiiriä hoidettiin penisilliinillä 2 mg / hiiri ja/tai erytromysiinillä 100 µg / hiiri., Isolaatti 86: lla (ei indusoitu) infektoituneita hiiriä hoidettiin penisilliinillä 150 µg/ hiiri ja/tai erytromysiinillä 100 µg/hiiri. Isolaatti 86-tartunnan saaneita hiiriä (jotka oli kasvatettu erytromysiinin sub-estävien pitoisuuksien yhteydessä ennen inokulaatiota) hoidettiin penisilliinillä 150 µg/hiiri ja/tai erytromysiinillä 100 µg/hiiri. Isolaatti 93-tartunnan saaneita hiiriä hoidettiin penisilliinillä 400 µg / hiiri ja/ tai erytromysiinillä 100 µg / hiiri.

verinäytteet saatiin orbitaalileikkauksilla sen jälkeen, kun hiiret nukutettiin CO2: lla., Hiiret kuolivat ja vatsakalvon pesee olivat sitten suoritetaan ruiskuttamalla 2 mL steriiliä keittosuolaliuosta, intraperitoneaalisesti, hierovat vatsan ja avaaminen vatsakalvon kerätä nestettä.15 veri-ja peritoneaalinestenäytettä laimennettiin välittömästi, ja 0,1 mL pinnoitettiin 5%: iin veren agar-levyistä.

in vivo time–kill-käyrät rakennettiin yhdelle pneumococcus-isolaateista (numero 93), jotka osoittivat merkittävää antagonismia in vivo. Pneumokokki vatsakalvon ja verta oli saatu sen jälkeen, kun rokotukset 36 intraperitoneaalisesti hiirille 5.0 × 106 cfu/mL bakteerisuspensiota., Kymmenen minuuttia, 80 min, 140 min, 3 h ja 5 h haasteen jälkeen lopetettiin kolmen kontrollihiiren ryhmät (jotka oli rokotettu steriilillä suolaliuoksella). 140 min: n, 3 h: n ja 5 h: n kuluttua altistuksesta kolmen hiiren ryhmät, joita hoidettiin erytromysiinillä 90 min: n kuluttua altistuksesta, lopetettiin. 3 h ja 5 h kuluttua haaste, ryhmiä kolme hiiriä hoidettiin joko yhdistelmä penisilliini ja erytromysiini tai penisilliini yksin 150 min jälkeen vatsaonteloon infektio tapettiin. Veri-ja peritoneaalipesuista otettiin näytteitä pneumokokkien kvantitatiivista viljelyä varten.,

Määrittäminen ED50 penisilliini yksittäisten pneumokokki

ED50, kerta-annos antaa suojan 50% hiiret, kunkin pneumokokki eristä määritettiin käsittelemällä ryhmissä viisi hiiret kaksinkertaistaa annoksia antibiootteja; selviytyminen hiirillä havaittiin 7 päivää. Ryhmä viisi hiiriä hoidettiin 0,9% NaCl oli mukana jokaisessa kokeessa kontrollina varten kuolleisuutta infektio. Kullekin isolaatille ED50 laskettiin Reedin menetelmällä & Muench16 ja Mäkiyhtälöstä (GraphPad Prism; GraphPad Software, Inc.,, San Diego, CA, Yhdysvallat). Emme tehneet mitään kokeita erytromysiini ED50s laskemiseksi, koska tämä on tehty aiemmin kannoille, joilla on samanlaisia mikrofoneja laboratoriossamme.17 valitsimme annoksia penisilliiniä, joka olisi odotettavissa, että seurauksena arviolta 95% selviytymisen hiiret ja erytromysiini annokset, jotka olisi tarkoitus seurauksena arviolta 10% selviytymisen hiiriä. Yhdistelmähoidossa antibiootit annettiin erillisinä injektioina.

Statistics

Fisherin tarkka testi kategorisille tiedoille käytettiin, ja sen merkitsevyys oli kaksipuolinen 5%.,

Tulokset

Mikrofonit penisilliini ja erytromysiini ja ED50s penisilliini neljä pneumokokki-kannat ovat esitetty Taulukossa. Tappava tartunta saatiin kolmella neljästä isolaatista. Isolaatti 86: n penisilliinin ED50 oli kuitenkin arvioitava, koska ED50-määrityskokeissa kuolleisuus oli mahdollista saavuttaa vain 90%.

aika–ajokokeiden tulokset on esitetty kuvassa 1., Tällä menetelmällä kaikki isolaatit osoittivat in vitro antagonismia penisilliinin ja erytromysiinin yhdistelmälle (Kuva 1a–C ja e), koska erytromysiini esti lähes täysin penisilliinin bakterisidisen vaikutuksen. Erytromysiiniresistenssin indusoidessa erytromysiiniresistenttiä isolaattia (numero 86) veren agar–levyissä, jotka sisälsivät erytromysiiniä 4 mg/L ennen time-kill-tutkimusta, erytromysiiniantagonismi neutralisoitiin (Kuva 1D).

kaikilla isolaateilla penisilliinin ja penisilliinin sekä erytromysiinin in vitro-lopetusvaikutus lisääntyi ajan myötä., Lasku pmy nähnyt valvonta-pullot joissakin kokeissa johtui autolyysin, yhteinen havainto kanssa pneumokokki. Kaikissa kokeissa erytromysiinillä yksinään oli pienempi tappava vaikutus kuin penisilliinillä ja yhdistelmällä. Erytromysiinille resistentin kannan inkubaation 5 tunnin aikana ei havaittu tappavaa vaikutusta riippumatta siitä, inkuboitiinko sitä erytromysiinillä vai ei. PH: ssa ei havaittu muutoksia yhden tai molempien antibioottien sisältämissä pulloissa: pH oli 7,5 inkubaation 0, 1, 2, 3, 4 ja 5 tunnin jälkeen.,

hiiren peritoniittimallissa havaittiin, että penisilliinin ja erytromysiinin yhdistelmähoito johti antagonismiin hiirillä, jotka altistettiin isolaateilla 75 ja 93 (Kuva 2b ja E). Erytromysiinillä 60 min ennen penisilliiniä hoidetuilla hiirillä kuolleisuus oli merkitsevästi suurempi kuin pelkällä penisilliinillä hoidetuilla hiirillä (isolaatti 75: kuolleisuus 32/36 ja 3/12, p < 0,05; isolaatti 93: kuolleisuus 24/36 ja 3/12, vastaavasti p < 0,05) (kuva 2)., Kahdessa muussa isolaatissa kuolleisuus hiirillä, jotka saivat molempia antibiootteja, oli samaa luokkaa kuin hiirillä, jotka saivat pelkkää penisilliiniä (Kuva 2a ja D). Kaikki verrokkihiiret kuolivat infektoituessaan vatsaonteloon pneumokokeilla, lukuun ottamatta isolaatti 86: lla infektoituneita hiiriä, joiden kuolleisuus oli 80-90%. Vaikka isolaatti 86: n bakteerirookulaatti nostettiin 108 pmy/mL: aan, kuolleisuus ei ollut 100%.

alhaisimmat kuolleisuusluvut olivat hiiriryhmillä, joita hoidettiin pelkällä penisilliinillä tai erytromysiinillä ja penisilliinillä yhdessä bakteerihaasteen jälkeen., Korkein kuolleisuus havaittiin verrokkihiirillä tai hiirillä, joita hoidettiin pelkällä erytromysiinillä 90 min pneumokokki-infektion jälkeen (kuva 2). Isolaatti 86: n osalta totesimme, että yhdistelmähoito antoi merkitsevästi paremman suojan pneumokokki-infektiota vastaan kuin pelkkä penisilliinihoito 150 minuutin jälkeen (32/35 hiirtä edellisessä ryhmässä säilyi elossa verrattuna 6/12 hiireen jälkimmäisessä; P = 0,009) tai erytromysiini (32/35 ja 16/36 eloonjääminen, P = 0,005) (Kuva 2C)., Kun erytromysiiniresistenssi indusoitiin ennen isolaatti 86: lla rokotusta, yhdistelmähoito antoi huomattavasti paremman suojan kuin pelkkä erytromysiini (31/36 hiirtä edellisessä ryhmässä säilyi elossa verrattuna 5/36 hiireen jälkimmäisessä; P = 0,005).

isolaatti 93: n in vivo–aikatappokäyrät osoittivat, että bakteerien kasvu veressä lisääntyi 1-2 logia 80 min altistuksen jälkeen verrattuna kontrollihiirillä 10 minuutin kuluttua altistuksesta (kuva 3), kun taas peritoneaalipesuissa pneumokokkien määrä 80 min: n kohdalla oli sama kuin 10 min rokotuksen jälkeen., Määrä pneumokokki viljellyt verestä ja vatsakalvon pesee eri ajankohtina eri ryhmissä olivat lähes rinnakkain, 1-2 log korkeampi pmy/mL vatsakalvon pesee kuin veressä. Bakteerien tappaminen oli tehokkainta penisilliinihoitoa saaneessa ryhmässä, jossa bakteerien kasvu väheni 3 lokin ja 4 lokin verran veressä ja peritoneaalipesuissa vastaavasti. Yhdistelmähoidolla oli samanlainen vaikutus bakteerien kasvuun kuin erytromysiiniä yksinään käytettäessä (antagonismi).,

Keskustelu

erytromysiinin ja penisilliinin yhteisvaikutuksia pneumokokkeihin tutkittiin neljällä isolaatilla, joilla oli erilainen alttius penisilliinille tai erytromysiinille. In vitro-aika–tappaa käyrät erytromysiini-herkkä eristää (Kuva 1a, b ja e) ilmaantui selkeä vihamielisyys välillä kaksi huumeita, eli läsnäolo erytromysiini täysin esti bakterisidinen penisilliiniä ja tuloksena käyrä oli samanlainen hidas estävä aktiivisuus erytromysiini yksin., Penisilliinin (joka on hapan) vaikutuksen estyminen saattoi johtua erytromysiinin (joka on emäksinen) aiheuttamasta pH-arvon noususta. Lääkeyhdistelmän sisältämien pullojen pH-mittauksissa ei kuitenkaan havaittu muutoksia pH: ssa. antagonistinen vaikutus havaittiin myös valmistamattomalla erytromysiinille resistentillä pneumokokki-isolaatilla (86), kun taas erytromysiiniresistenssigeenin ilmentymisen induktio esti erytromysiinin estävän vaikutuksen ja sen antagonistisen vaikutuksen penisilliiniin., Nämä tulokset osoittavat selvästi, että juuri makrolidin inhiboiva vaikutus bakteerien kasvuun tai solujen jakautumiseen on tärkein syy antagonismiin penisilliiniä vastaan, joka voi vaikuttaa vain kasvuvaiheessa oleviin bakteereihin ja tuottaa soluseinän.15 Tämä erytromysiinin bakteriostaattinen vaikutus ja sen estävä vaikutus penisilliiniin olivat selvästi nähtävissä in vivo-kokeissa.,

arvioidaksemme näiden kahden lääkkeen mahdollista vuorovaikutusta in vivo valitsimme hiiren peritoniittimallin, joka on aiemmin ollut hyödyllinen antibioottien välisen vuorovaikutuksen osoittamisessa, 6 ja jonka avulla voidaan myös tutkia bakteerien vaikutusta tekemällä in vivo time–kill-kokeita peritoneumin ja / tai veren eliöillä.17 Annoksia penisilliini ja erytromysiini valittiin mukaan Hill yhtälö sigmoid annos–vaikutus-käyriä, siten, että penisilliini yksin olisi tarkoitus johtaa c., 95%: n elossaoloaika, kun taas erytromysiini yksinään estäisi kuolleisuuden vain 10%: lla hiiristä. Näillä annoksilla erytromysiiniannoksen vaikutus, johon myöhemmällä penisilliiniannoksella ei ole vaikutusta, johtaisi kuolleisuuteen, joka määritettäisiin yksinomaan makrolidin aktiivisuuden perusteella. Vihamielinen toiminta kaksi huumeita oli myöhemmin vahvisti, aika–kill käyrät in vivo, koska samaan kasvua estävä aktiivisuus erytromysiini, kuten on osoitettu in vitro., Merkitystä induktio erytromysiini vastus erytromysiini kestävä eristää (numero 86) oli myös osoittanut in vivo: induktio kanssa erytromysiini merkittävästi vähentynyt selviytymisen huolimatta erytromysiini hoitoon verrattuna selviytymisen seuraavat erytromysiini hoito uninduced pneumokokki.

yhdellä erytromysiinille herkällä isolaatilla (numero 73) ei ollut mahdollista osoittaa antagonismia in vivo käytetyllä menetelmällä. Tälle voi olla useita selityksiä., Mahdollisuus, että kaikki pneumokokit eivät reagoi samalla tavalla kuin kaksi käytettyä lääkettä, vaikuttaa epätodennäköiseltä, varsinkin kun aktiivisuus oli yhtä todistettavissa in vitro. On todennäköisempää, että tilanne In vivo on erilainen eri kantojen osalta, esimerkiksi pneumocccin virulenssi riippuu useista vaikeasti standardoitavista tekijöistä, kuten kapselin tyypistä ja koosta, muista kalvoon tai toksiineihin liittyvistä virulenssitekijöistä tai kasvukäyttäytymisestä in vivo, joka on hyvin vaihteleva pneumokokeille., On todennäköistä, että voisimme ovat osoittaneet vihamielisyyttä in vivo eristää 73 jos meillä oli ’, joiden’ ymppi ja ajoitus kaksi huumeiden suhteessa toisiinsa, mutta tämä vaatisi liiallinen määrä eläimiä., Näiden kahden lääkkeen yhteisvaikutuksen selkeä osoittaminen ainakin kahta pneumokokkikantaa vastaan sekä in vitro että In vivo, mikä osoitettiin kuolleisuuden lisääntymisellä ja In vivo–aikatappokäyrien muutoksilla, on riittävä näyttö vaikutuksesta, ja sen pitäisi varoittaa kliinikkoja näiden kahden lääkkeen käytöstä yhdessä pneumokokkitartuntojen hoitoon.

bakteriostaattisen proteiinisynteesin estäjän, kuten penisilliinin tai ampisilliinin, antagonismin kliininen merkitys, esim., tetrasykliini, erytromysiini tai kloramfenikoli on osoitettu useissa tutkimuksissa.7-12, 18 antagonismi on vahvistettu in vivo kokeellisessa tutkimuksessa penisilliinillä ja kloramfenikolilla pneumokokkimeningiittiä vastaan koirilla.19 huolimatta tästä aikaisesta kokemuksesta tällaisten lääkeyhdistelmien kanssa penisilliinin ja erytromysiinin yhdistelmää suositellaan jopa tavanomaisissa oppikirjoissa empiirisenä hoitona tuntemattoman etiologian keuhkokuumeessa.4 lääkeyhdistelmä valitaan erityisesti pneumokokkeihin ja Legionella spp: hen.,, joita pidetään tärkeinä ja tappavina aetiologisina tekijöinä keuhkokuumeessa. On vaikea tietää, soveltuvatko tämän tutkimuksen tulokset suoraan kliiniseen tilanteeseen. Kliinisessä tilanteessa ei yleensä käytettäisi optimaalisia erytromysiiniannoksia, mutta penisilliinin estävällä vaikutuksella voidaan joutua turvautumaan erytromysiinin bakteriostaattiseen vaikutukseen, jos pneumokokki on erytromysiinille altis. Ei tiedetä, esiintyykö erytromysiinin indusoitavissa oleva vaikutus myös ihmisen pneumonisessa fokuksessa.,

johtopäätöksenä tässä tutkimuksessa on osoitettu penisilliinin ja erytromysiinin välinen antagonismi kolmea pneumokokkien erytromysiinille herkkää isolaattia vastaan in vitro. Tämä antagonismi esiintyi myös kahden isolaatin kanssa In vivo yksinkertaisessa kokeellisessa mallissa hiirillä. Kun erytromysiini vastus ei aiheuttama vihamielisyys oli myös osoittanut in vitro erytromysiini resistenttien pneumokokki-isolaatti, mutta induktio kanssa erytromysiini ennen inokulointia hävitetty antagonistinen vaikutus.

Anja Borumin ja Jytte Mark Andersenin teknistä asiantuntija-apua arvostetaan suuresti., Ennakkotietojen esitetty lopullisessa muodossaan tässä käsikirjoitus esiteltiin kolmaskymmenesseitsemäs Interscience Konferenssi Mikrobilääkkeille ja Kemoterapiaa, Toronto, Ontario, Kanada, 28. syyskuuta–1. lokakuuta 1, 1997 (juliste A-29).