de Către CPR Louisville la 1 iulie, 2014 | 6:06 pm | Print
NECUNOSCUT RAPORT de LABORATOR
Număr Necunoscut 105
Michelle Sinovcic
BIO 203: Microbiologie generală
Primavara 2014
INTRODUCERE
Identificarea și înțelegerea microorganisme este importantă pentru mai multe motive fiind că bacteriile sunt o cauză majoră a bolilor umane și boală., A fi capabil să vindece mai multe infecții și boli se poate face prin a fi bine informat despre diferite microorganisme și modul în care acestea funcționează în medii diferite. Acest studiu de identificare a bacteriilor necunoscute a fost realizat prin utilizarea diferitelor tehnici utilizate în clasa de laborator de Microbiologie până în acest moment.
materiale și metode
o eprubetă de bulion care conține bacterii necunoscute etichetate cu numărul 105 a fost primită de la profesorul de laborator de Microbiologie. O varietate de proceduri învățate în clasa de laborator de Microbiologie au fost efectuate pe bacteriile necunoscute., Aceste teste au fost efectuate conform instrucțiunilor în microbiologie curs lab manual de Mcdonald, Thoele, Salsgiver, și Gero (1) dacă nu se prevede altfel.
prima metodă necesară a fost metoda streak quadrant. Acest lucru a fost făcut pentru a izola cele două bacterii necunoscute pe o placă de agar nutritiv prin utilizarea unei bucle de inoculare, a arzătorului Bunsen și a bulionului. Incubarea acestei plăci la temperatura camerei a fost apoi efectuată pentru a încerca determinarea a două colonii separate., Creșterea dintr-o colonie de pe această placă a fost apoi testată pentru răspunsul său Gram prin etape de colorare gram folosind iod, violet de cristal, alcool și safranină pentru a găsi un singur tip de bacterie. Observația sub microscop a reavealed răspunsul gram al bacteriei din colonie. Enumerate în tabelul 1 sunt procedurile luate, materialele utilizate, temperatura de incubare și rezultatele înregistrate pentru prima bacterie. În aceste teste sunt incluse citratul, fermentația glucozei și lactozei, reducerea sulfului printr-un test de fier Kligler, testul ureei și testul roșu de metil.,au fost luate apoi măsurile necesare pentru a efectua un test de citrat Simmon pe prima colonie bacteriană folosind o buclă de inoculare sterilizată de flacăra unui arzător Bunsen pentru a pune creșterea pe panta agarului verde. Incubarea acelui tub a fost apoi făcută timp de cinci zile într-un cadru de 35°C. Determinarea utilizării de către bacterie a citratului ca unică sursă de carbon a fost motivul din spatele acestui test.un test de fier Kligler a fost efectuat folosind Creșterea din prima colonie pentru a restrânge opțiunile posibile ale bacteriei prin determinarea capacităților sale de fermentare pentru glucoză și lactoză., Mediul a fost înjunghiat de un ac de inoculare sterilizat cu flacără, cu creștere bacteriană pe el și incubat la 35°C timp de cinci zile.un test de uree a fost următorul test finalizat pe această colonie gram-negativă. Acest lucru a fost realizat prin agitarea o parte din bacterie în indicatorul de pH fenol roșu și uree flacără mediu sterilizat bucla de inoculare. A fost apoi incubat într-un cadru de 35°C timp de patruzeci și opt de ore. Descoperirea dacă bacteria ar putea produce sau nu un acid a fost scopul din spatele acestui test., Un test roșu de metil a fost, de asemenea, efectuat pe bacteriile gram-negative pentru a determina dacă bacteria a produs sau nu acid după fermentarea glucozei. O buclă de inoculare sterilizată cu flacără cu creștere bacteriană pe ea a fost agitată în jurul tubului proteinei și glucozei MR-VP și incubată la 35°C timp de patruzeci și opt de ore. Aceste teste au fost efectuate pentru a confirma rezultatul final al bacteriei gram-negative necunoscute.o a doua placă de agar nutritiv a fost strecurată în încercarea de a găsi o secundă de bacterii., A doua metodă este necesar de a izola cea de-a doua bacterie, în special un gram-pozitive bacterii, a fost realizat prin utilizarea unui inocularea buclă sterilizate printr-un arzător Bunsen pentru a răspândi supa de original tubului pe o mannitol salt agar placa care a fost incubate la 35°C timp de patru zile. După ce nu a apărut nicio creștere, o creștere bacteriană gram-pozitivă izolată pe o pantă într-o eprubetă etichetată Alt 8 a fost apoi primită de la instructorul de laborator. Testele au fost apoi efectuate în acest sens., În tabelul 2 sunt enumerate testele efectuate, materialele utilizate, temperatura de incubare și rezultatele înregistrate pentru a doua bacterie. Au fost efectuate teste de cazeină și un test de Matloză.prima procedură necesară pentru această creștere a fost o pată gram. S-au folosit violet de cristal, iod, alcool și safranin. Răspunsul gram al bacteriei a fost testat pentru a restrânge opțiunile pentru ceea ce poate fi acest necunoscut.un test de cazeină a fost următoarea procedură efectuată pe bacteria gram-pozitivă pentru a determina dacă bacteria ar putea produce enzima casează., O buclă de inoculare a fost sterilizată cu flacără, acoperită cu o creștere bacteriană și răspândită pe o placă de agar de lapte. Incubarea acestei plăci a fost făcută într-un cadru de 35°C timp de cinci zile.un test de maltoză a fost următoarea metodă utilizată pentru a confirma identitatea bacteriei necunoscute. Aceasta ar determina dacă bacteria ar putea produce sau nu acid din fermentația maltozei. O buclă de inoculare sterilizată cu flacără cu creștere bacteriană a fost agitată în jurul mediului. Tubul a fost apoi incubat la 35°C timp de cinci zile.,
rezultatele
incluse în tabelul 1 sunt testele efectuate, materialele utilizate, temperaturile de incubare și rezultatele de la bacteria gram-negativă, Tabelul 2 arată acestea pentru gram-pozitiv. Incluse în organigrama 1 sunt testele și rezultatele lor pentru bacteria gram-negativă, Organigrama 2 arată acestea pentru gram-pozitiv.,d=”5fa084a25a”>Maltoza test
DISCUȚII / CONCLUZII
La diverse teste de microbiologie laborator clasa manuale care au fost efectuate atât asupra germenilor gram-negativi și bacterii gram-pozitive sunt ceea ce a condus la identitatea lor., Primul pas făcut a fost izolarea bacteriei din bulionul original # 105 în două colonii separate folosind metoda Quadrant streak pe o placă de agar nutritiv.
după ce a lăsat prima placă de streak să se incubeze la temperatura camerei timp de cinci zile, a existat o creștere pe primele două dungi, dar ultimele două nu au avut niciuna. Această creștere a constat doar dintr-o colonie distinctă, o secundă nu a fost prezentă. Acest lucru a dus apoi la colorarea gram a acelei colonii, o a doua placă de streak pe agar nutritiv în încercarea de a crește a doua colonie necesară și utilizarea unei plăci de Agar de sare de manitol.,la observarea diapozitivului colorat gram al primei colonii sub microscop s-au observat coccobacili roz. Văzând aceste tije aproape rotunde s-a dovedit că aceasta a fost o colonie bacteriană gram-negativă. Având în vedere că toate opțiunile gram-negative erau tije, acest lucru nu a restrâns niciuna dintre posibilități.
știind că bacteria gram-negativă a crescut, metoda Quadrant streak a fost folosită din nou pe o placă de agar nutritiv, în speranța de a crește și bacteria gram-pozitivă., De asemenea, folosind bulionul din tubul #105, a fost acoperită o placă de Agar de sare de manitol, fiind selectată pentru creșterea bacteriană gram-pozitivă. La verificarea rezultatelor după incubare, nu a existat nici o creștere pe această placă și încă nici o a doua colonie distinctă. S-a administrat apoi o bacterie gram-pozitivă izolată marcată cu Alt 108.
primul test efectuat pe colonia gram-negativă a fost un test de citrat folosind o înclinare a agarului citrat de Simmon verde inoculat prin punerea creșterii pe partea superioară a pantei. După incubare oblic a transformat o culoare albastră, rezultând într-un test pozitiv., Acest lucru a arătat că bacteria folosește citratul ca sursă principală de carbon. Acest lucru a exclus, de asemenea, Escherichia coli ca o posibilitate pentru bacteria mea gram-negativă. Următorul test a fost testul de fier Kligler.testul de fier Kligler a constat în înjunghierea unei pante pentru a testa reducerea sulfului, fermentarea glucozei și fermentarea lactozei. După incubare, partea superioară a pantei a devenit roșie, iar partea inferioară a fost galbenă. Aceste rezultate au arătat un rezultat negativ pentru hidrogen sulfurat, deoarece nu exista negru în tub, ceea ce însemna că Proteus vulgaris nu mai era o opțiune., Culoarea roșie și fundul galben au arătat atât fermentația pozitivă a glucozei, care a exclus Pseudomonas aeruginosa. Atât Proteus vulgaris, cât și Pseudomonas aeuginosa au fost excluse de rezultatul negativ al lactozei. Următoarea metodă utilizată a fost un test de uree.acest test a constat în agitarea creșterii bacteriene într-un tub de roșu fenol și uree pentru a testa prezența acidului. După incubare, bulionul era încă o culoare galbenă, dând un rezultat negativ. Acest lucru a confirmat faptul că Enterobacter aerogenes a fost bacteria gram-negativă. De asemenea, a fost efectuat un test roșu de metil pentru a confirma acest răspuns.,creșterea bacteriană a fost agitată în bulionul MR-VP și proteic pentru a determina dacă acidul ar putea fi produs ca urmare a fermentației glucozei. După incubare, bulionul a fost o culoare galbenă; un rezultat negativ. Acest lucru a confirmat, de asemenea, că bacteria necunoscută a fost Enterobacter aerogenes.
primul test efectuat pe creșterea gram-pozitivă a fost o pată gram. După efectuarea procedurii care implică cristal violet, iod, alcool și safranin și vizualizarea diapozitivului sub microscop, s-au văzut tije purpurii., Forma fiind tije redus în jos opțiunile pentru Bacillus cereus și Bacillus subtilis. Următorul test efectuat pe această creștere a fost un test de cazeină.creșterea bacteriană a fost răspândită pe o placă de agar de lapte pentru a vedea dacă bacteria a produs casează și a descompune cazeina. După incubare, placa a avut o creștere albă pe ea, dând un rezultat negativ. Acest rezultat negativ a făcut posibilă excluderea opțiuniibacillus cereus. Aceasta a însemnat o confirmare a faptului că bacteria gram-pozitivă a fost Bacillus subtilis. Pentru a obține oa doua confirmare a fost efectuat un test de maltoză.,creșterea bacteriană a fost agitată într-un tub care conține un mediu de maltoză roșie pentru a testa acidul ca rezultat al fermentației maltozei. După incubare, lichidul a fost o culoare galbenă, dând un rezultat pozitiv pentru producția de acid. Acest rezultat a confirmat bacteria ca fiind Bacillus cereus. Acesta a fost un rezultat opus decât a arătat testul de cazeină.
după ce a vorbit cu profesorul de laborator despre rezultate, testul de cazeină a fost confirmat ca având rezultate adevărate. Bacteria gram-pozitivă necunoscută a fost confimată ca fiind Bacillus cereus, iar gram-negativ fiind Enterobacter aerogenes.,Enterobacter aerogenes este frecvent văzută ca fiind cauza infecțiilor tractului respirator inferior, infecții ale pielii și țesuturilor moi, infecții ale tractului urinar (UTI), endocardită, infecții intraabdominale, artrită septică, osteomielită, infecții ale SNC și infecții oftalmice. (2) o problemă cu infecții Enterobacter este că acestea de multe ori nu pot fi diferențiate de alte infecții bacteriene acute.terapia antimocribală cu un singur agent este de obicei utilizată în cazurile de infecții cu Enterobacter., (3) Beta-lactamine, Aminoglicozide, Fluroquinolones, și Trithomprim-sulfamethoxazone (TMP-SMZ) sunt toate antibioticele utilizate în mod regulat pentru a trata aceste tipuri de infecții. (2) o problemă cu acest lucru este că, atunci când obtinerea prea mult expunerea la aceste medicamente rezistenta este adesea dezvoltat, care a arătat în prezent o mare problemă cu aceste infecții. Datorită acestor rezistențe, combinarea antibioticelor cu structuri diferite este acum utilizată ca tratament pentru infecții, terapie combinată.Mcdonald, Victoria, Mary Thoele, Bill Salsgiver și Susie Gero. Manual de laborator pentru Microbiologie generală., N. p.: n.p., 2011. Print.