Învățământ Apendicele

Un singur lanț variabilă fragment (scFv) este o proteină de fuziune a variabilei regiuni de greu (VH) și lanțuri ușoare (VL) de imunoglobuline, în legătură cu un scurt linker peptide de zece la aproximativ 25 de aminoacizi. Linker-ul este de obicei bogat în glicină pentru flexibilitate, precum și serină sau treonină pentru solubilitate și poate conecta n-terminusul VH cu C-terminusul VL sau invers., Această proteină păstrează specificitatea imunoglobulinei originale, în ciuda eliminării regiunilor constante și a introducerii linker-ului.aceste molecule au fost create pentru a facilita afișarea fagului , unde este foarte convenabil să se exprime domeniul de legare a antigenului ca o singură peptidă. Ca alternativă, scFv poate fi creat direct din lanțuri grele și ușoare subclonate derivate dintr-o hibridomă. ScFvs au multe utilizări, de exemplu, citometrie de flux, imunohistochimie și ca domenii de legare a antigenului receptorilor artificiali ai celulelor T.,

spre Deosebire de anticorpi monoclonali, care sunt adesea produse în culturi de celule de mamifere, scFvs sunt mai multe de multe ori produse în bacterii, culturi de celule, cum ar fi E. coli

fragment antigen-binding (fragment Fab) este o regiune de pe un anticorp care se leagă de antigeni. Este compus dintr-un domeniu constant și unul variabil al fiecărui lanț greu și ușor. Aceste domenii formează paratopul-situsul de legare a antigenului-la capătul terminal amino al monomerului. Cele două domenii variabile leagă epitopul de antigenele lor specifice.,

într-un cadru experimental, fragmente Fc și Fab pot fi generate în laborator. Enzima papaină poate fi utilizată pentru a scinda un monomer de imunoglobulină în două fragmente Fab și un fragment Fc. Enzima pepsină se descompune sub regiunea balamalei, astfel încât se formează un fragment F(ab’)2 și un fragment pFc’. Fragmentul F(ab’)2 poate fi împărțit în două fragmente Fab’ prin reducere ușoară.,regiunile variabile ale lanțurilor grele și ușoare pot fi topite împreună pentru a forma un fragment variabil cu un singur lanț (scFv), care este doar jumătate din dimensiunea fragmentului Fab, dar păstrează specificitatea inițială a imunoglobulinei părinte.

Un diabody este de două scFvs cu conectat cu linker peptide care sunt prea scurte pentru cele două variabile regiuni ori împreună (aproximativ cinci aminoacizi), forțând scFvs să dimerize. Diabodies au dovedit a avea constantele de disociere până la 40 de ori mai mic decât corespunzătoare scFvs, în sensul că au o mult mai mare afinitate față de ținta lor.,

două scFv (care se leagă de antigene identice sau diferite) pot fi, de asemenea, conectate cu legături mai lungi, cum ar fi fermoarele de leucină.

Leave a Comment