oktatási függelék

az egyláncú változó fragmentum (scFv) az immunglobulinok nehéz (VH) és könnyű láncainak (VL) változó régióinak fúziós fehérje, amely egy tíz-körülbelül 25 aminosavból álló rövid linker peptidhez kapcsolódik. A linker általában gazdag glicinben a rugalmasság érdekében, valamint szerin vagy treonin az oldhatóság érdekében, vagy összekapcsolhatja a VH N-terminusát a VL C-terminusával, vagy fordítva., Ez a fehérje megtartja az eredeti immunglobulin specifikusságát, annak ellenére, hogy az állandó régiók eltávolítása és a linker bevezetése megtörtént.

ezeket a molekulákat azért hozták létre , hogy megkönnyítsék a fág megjelenítését, ahol nagyon kényelmes az antigénkötő domént egyetlen peptidként kifejezni. Alternatív megoldásként az scFv közvetlenül a hybridomából származó nehéz és könnyű láncokból hozható létre. Az scfv-knek számos felhasználása van, például áramlási citometria, immunhisztokémia, valamint a mesterséges T-sejt receptorok antigénkötő doménjei.,

Ellentétben a monoklonális antitestek, amelyek gyakran termelt emlőssejt kultúrák, scFvs gyakrabban elő a baktérium sejt kultúrákban, például E. coli

A töredék antigén-kötelező (Fab töredék) egy régió, egy antitest kötődik antigének. A nehéz és könnyű láncok egy állandó és egy változó tartományából áll. Ezek a domének képezik a paratópot-az antigénkötő helyet — a monomer amino terminális végén. A két változó tartomány az epitópot specifikus antigénjeikhez köti.,

kísérleti környezetben Fc és Fab fragmensek keletkezhetnek a laboratóriumban. A papain enzim segítségével egy immunglobulin monomert két Fab fragmentumra és egy Fc fragmentumra lehet hasítani. A pepszin enzim a zsanérrégió alatt hasad, így egy F (ab’) 2 fragmentum és egy pFc’ fragmentum keletkezik. Az F(ab’)2 fragmentum enyhe redukcióval két Fab’ fragmensre osztható.,

a nehéz és könnyű láncok változó régiói összeilleszthetők, hogy egyláncú változó fragmentumot (scFv) képezzenek, amely csak a Fab fragmentum méretének fele, mégis megtartja a szülő immunglobulin eredeti specifitását.

a diabody két scfv, amelyek összekapcsolódnak a linker peptidekkel, amelyek túl rövidek ahhoz, hogy a két változó régió össze tudjon hajtani (körülbelül öt aminosav), arra kényszerítve az scfv-ket, hogy dimerizáljanak. Diabodies kimutatták, hogy disszociációs állandók akár 40-szer alacsonyabb, mint a megfelelő scFvs, ami azt jelenti, hogy van egy sokkal nagyobb affinitást a cél.,

két scFv (amelyek ugyanazon vagy különböző antigénekhez kötődnek) hosszabb bélésekkel, például leucin cipzárral is összekapcsolhatók.

Leave a Comment