En enkelt kæde variabel fragment (scFv) er en fusion protein af de variable regioner tunge (VH) og lette kæder (VL) af immunoglobuliner, som er forbundet med en kort linker peptid af ti, at omkring 25 aminosyrer. Linkeren er normalt rig på glycin for fleksibilitet, såvel som serin eller threonin for opløselighed, og kan enten forbinde VH ‘s n-ende med VL’ S C-ende eller omvendt., Dette protein bevarer specificiteten af det oprindelige immunoglobulin, på trods af fjernelse af de konstante regioner og indførelsen af linkeren.
disse molekyler blev oprettet for at lette fagdisplayet , hvor det er meget praktisk at udtrykke det antigenbindende domæne som et enkelt peptid. Som et alternativ kan scFv oprettes direkte fra subcloned tunge og lette kæder afledt af et hybridom. Scfv ‘ er har mange anvendelser, f.eks. Flo .cytometri, immunhistokemi og som antigenbindende domæner af kunstige T-cellereceptorer.,i modsætning til monoklonale antistoffer, der ofte produceres i pattedyrscellekulturer, produceres scfv ‘ er oftere i bakteriecellekulturer, såsom E. coli
fragmentet antigenbindende (Fab fragment) er en region på et antistof, der binder til antigener. Den består af et konstant og et variabelt domæne af hver af de tunge og den lette kæde. Disse domæner danner paratopen-antigenbindingsstedet — ved den aminoterminale ende af monomeren. De to variable domæner binder epitopen på deres specifikke antigener.,
i en eksperimentel indstilling kan FC-og Fab-fragmenter genereres i laboratoriet. En papymet papain kan bruges til at spalte en immunoglobulinmonomer i to Fab-fragmenter og et FC-fragment. En .ymet pepsin spalter under hængselområdet, så der dannes et F(ab’)2-fragment og et PFC’ – fragment. F (ab’)2-fragmentet kan opdeles i to Fab’ – fragmenter ved mild reduktion.,
de variable regioner i de tunge og lette kæder kan smeltes sammen for at danne et enkeltkædet variabelt fragment (scFv), som kun er halvdelen af Fab-fragmentet, men bevarer den oprindelige specificitet af moderimmunoglobulinet.en diabody er to scfv ‘er med forbundet med linker-peptider, der er for korte til, at de to variable regioner kan foldes sammen (ca.fem aminosyrer), hvilket tvinger scfv’ erne til at dimerisere. Diabodies har vist sig at have dissociationskonstanter op til 40 gange lavere end tilsvarende scfv ‘ er, hvilket betyder, at de har en meget højere affinitet til deres mål.,
to scFv ‘ er (som binder til de samme eller forskellige antigener) kan også være forbundet med længere linkere, såsom leucin lynlåse.