jednočinný variabilní fragment (scFv) je fúzní protein proměnných oblastí těžkých (VH) a lehkých řetězců (VL) imunoglobulinů spojených s krátkým peptidem linker o deseti až asi 25 aminokyselinách. Linker je obvykle bohatý na glycin pro flexibilitu, stejně jako serin nebo threonin pro rozpustnost a může buď spojit n-konec VH s C-koncem VL, nebo naopak., Tento protein si zachovává specificitu původního imunoglobulinu, A to navzdory odstranění konstantních oblastí a zavedení linkeru.
tyto molekuly byly vytvořeny pro usnadnění zobrazení fágů, kde je velmi výhodné vyjádřit doménu vázající antigen jako jediný peptid. Jako alternativu lze scFv vytvořit přímo z podtříděných těžkých a lehkých řetězců odvozených od hybridomu. Scfv mají mnoho využití, např. průtokovou cytometrii, imunohistochemii a jako antigen vázající domény umělých T buněčných receptorů.,
na rozdíl od monoklonálních protilátek, které se často produkují v kulturách savčích buněk, jsou scfv častěji produkovány v kulturách bakteriálních buněk, jako je E.coli
vazba na antigen fragmentu (Fab fragment) je oblast na protilátce, která se váže na antigeny. Skládá se z jedné konstanty a jedné proměnné domény každého těžkého a lehkého řetězce. Tyto domény formují paratop-místo vázající antigen-na koncovém konci monomeru. Dvě proměnné domény váží epitop na jejich specifické antigeny.,
v experimentálním prostředí mohou být v laboratoři generovány fragmenty Fc a Fab. Enzym papain může být použit k štěpení monomeru imunoglobulinu na dva fragmenty Fab a fragment Fc. Enzym pepsin se štěpí pod kloubovou oblastí, takže se vytvoří fragment F(ab‘)2 a fragment PFC. Fragment F (ab‘) 2 lze mírným redukcí rozdělit na dva Fab fragmenty.,
variabilní oblasti těžkých a lehkých řetězců mohou být spojeny dohromady, aby vytvořily variabilní fragment s jedním řetězcem (scFv), který má pouze polovinu velikosti fragmentu Fab, přesto si zachovává původní specificitu nadřazeného imunoglobulinu.
diabody jsou dva scfv s propojenými peptidy linker, které jsou příliš krátké na to, aby se obě variabilní oblasti složily dohromady (asi pět aminokyselin), což nutí scfv k dimerizaci. Bylo prokázáno, že diabodie mají disociační konstanty až 40krát nižší než odpovídající scfv, což znamená, že mají mnohem vyšší afinitu k jejich cíli.,
dva scFv (které se váží na stejné nebo různé antigeny) mohou být také spojeny s delšími linkami, jako jsou leucinové zipy.