hranice ve farmakologii

Úvod

několik studií na zvířatech však ukázalo, že CBD produkuje obrácené křivky dávkové odpovědi ve tvaru písmene U. Tyto křivky byly poprvé popsány u potkanů testovaných v modelu úzkosti zvýšené Plus maze (EPM) (Guimarães et al., 1990). V této studii CBD zvýšil průzkum otevřených paží (anxiolytický účinek) v dávkách 2, 5-10 mg/kg, ale ne 20 mg/Kg (Guimarães et al., 1990)., Podobné křivky dávkové odpovědi ve tvaru zvonu byly popsány v jiných studiích zkoumajících behaviorální účinky CBD. Například, danio pruhované léčených 0,5 mg/kg CBD strávil podstatně více času v horní zóně akvária (což je interpretováno jako anxiolytikum-jako účinek), zatímco chování ryb ošetřených nejnižší (0,1 mg/kg) a nejvyšší dávky (5 a 10 mg/kg) se nelišila od kontrol (Nazario et al., 2015). Podobný vzorec byl také pozorován u spontánně hypertenzních potkanů (SHRs), které představují fenotyp podobný schizofrenii., Inhibice prepulse u tohoto kmene potkanů byla obrácena o 30 mg / kg CBD, ale ne o dávky 15 a 60 mg/kg (Levin et al., 2014). Totéž bylo pozorováno pomocí modelu kognitivních poruch indukovaných reserpinem u potkanů, zvířecího modelu Parkinsonovy choroby i tardivní dyskineze. Zatímco CBD v dávce 0, 5 mg/kg oslabil deficit paměti vyvolaný reserpinem v diskriminačním úkolu, dávka 5 mg/kg se ukázala jako neúčinná (Peres et al., 2016).,

existuje jasná potřeba prozkoumat nové způsoby zvládání úzkostných poruch, protože jejich léčba zůstává problematická a obvykle zahrnuje kombinaci léků, včetně benzodiazepinů a antidepresiv. Tyto léky mají své nevýhody, jako je riziko závislosti a abstinenční syndrom, sexuální vedlejší účinky, kognitivní a psychomotorické postižení, opožděný nástup účinku (antidepresiva), nízké přijetí, a požadavek na pečlivé dávkování ovládání (Katzman et al., 2014; Bandelow et al., 2015; Sgnaolin et al., 2016)., Zdá se, že CBD nevyvolává významné nežádoucí účinky u lidí (Bergamaschi et al., 2011b). Z možného terapeutického hlediska je však nezbytné určit, zda je podobný obrácený vzorec dávkové odpovědi ve tvaru písmene U přítomen také u lidí. Abychom tuto možnost prozkoumali, vybrali jsme jeden z nejkonzistentnějších účinků CBD, akutní pokles úzkosti. Tento účinek byl popsán u několika zvířecích modelů a u zdravých dobrovolníků a pacientů se sociální úzkostnou poruchou (SAD) (Guimarães et al., 1990; Zuardi et al., 1993; Bergamaschi et al., 2011A; Crippa et al.,, 2011); nebyla však zkoumána pomocí více dávek u lidí.

jednou široce používanou metodou pro vyvolání experimentální úzkosti u lidí je simulovaná řečnická úloha (SPST-Graeff et al., 2003). SPST je velmi konzistentní při zvyšování sebehodnocení úzkosti. Jeho účinky na fyziologické reakce (srdeční frekvence, krevní tlak a sekrece kortizolu) jsou však méně konzistentní (Palma et al., 1994; Hetem et al., 1996; de-Paris et al., 2003)., Meta-analýza 11 studií, které používají SPST to potvrdil pozorování, ukazující výrazný nárůst celkové velikosti účinku na subjektivní úzkost, ale ne na systolický krevní tlak (SBP) a srdeční frekvence (Zuardi et al., 2013). Řídké důkazy v literatuře naznačují, že veřejné mluvení v situaci v reálném životě je účinnější pro zvýšení fyziologických odpovědí (Turner et al., 1990; Dickerson and Kemeny, 2004). V nedávné studii jsme porovnali test veřejného mluvení v reálné situaci (TPSRS) a SPST., Výsledky ukázaly, že obě metody jsou účinné při zvyšování subjektivní úzkost, ale pouze TPSRS zvýšená srdeční frekvence, SBP, a diastolický krevní tlak (DBP) (Zuardi et al., 2013).

tato studie byla proto navržena tak, aby otestovala hypotézu, že zvýšení dávek CBD by vyvolalo anxiolytické účinky v obráceném vzoru dávkové odpovědi ve tvaru písmene U U zdravých dobrovolníků předložených TPSRS.,

Materiály a Metody

Témata

Šedesát zdravých mužů a žen ve věku 18-35 let, bez historie minulosti nebo současné psychiatrické onemocnění, alkohol nebo jiné drogové závislosti byly přijímáni prostřednictvím inzerátu v kampusu University of São Paulo v Ribeirão Preto. Účastníci s velkými zdravotními stavy nebo kteří užívali léky s potenciálem zasahovat do výsledků studie nebyli zahrnuti., Dobrovolníci byli dotazováni za účelem posouzení způsobilosti a měřit jejich sklon k úzkosti přes vlastnost verze Spielbergerem State-Trait Anxiety Inventory (STAI – Spielbergerem et al., 1970). Způsobilí účastníci, kteří souhlasili s účastí byli instruováni, aby se zdržely drogy v týdnu před konáním zkoušky a z alkoholu a kofeinu 24 hodin před zkouškou., Všichni dobrovolníci podepsali písemný informovaný souhlas k účasti poté, co byl plně informován o výzkumných postupů, které byly v souladu se stávající podmínky, Helsinské Deklarace a byly schváleny Etickou komisí Ribeirão Preto Lékařské fakultě Univerzitní Nemocnice (HCRP -Č. 12407/09).

dobrovolníci byli náhodně přiděleno do pěti skupin s 12 předměty každý dostávat různé dávky CBD (100, 300 a 900 mg), clonazepam (1 mg) nebo placebem v dvojitě zaslepené, randomizované designu., Skupiny byly porovnány podle pohlaví, věku, indexu tělesné hmotnosti (BMI) a skóre STAI-trait. Jeden dobrovolník ze skupiny CBD – 300 se nemohl zúčastnit experimentálního zasedání kvůli osobním problémům a byl stažen ze studie.

léky

Kanabidiolový prášek s čistotou 99, 6% (bez přítomnosti jiných kanabinoidů) rozpuštěný v kukuřičném oleji v dávkách 100 a 200 mg/ml byl laskavě poskytnut Biosynthesis Pharma Group (BSPG-Pharm, Sandwich, UK). Roztok CBD, tablety clonazepamu (Rivotril®, Roche Lab) a placebo (kukuřičný olej) byly baleny ve stejných želatinových kapslích., Všichni dobrovolníci obdrželi pět tobolek jeden mililitr každý, v následujících kombinacích: pět kapsle obsahující kukuřičný olej (placebo skupina); jedna tobolka CBD 100 mg/ml a čtyři tobolky kukuřičný olej (CBD-100 skupina); tři kapsle CBD 100 mg/ml a dvě tobolky kukuřičný olej (CBD-300 skupina); čtyři kapsle CBD 200 mg/ml a jedna tobolka CBD 100 mg/ml (CBD-900 group); a jedna tobolka s clonazepam a čtyři tobolky kukuřičný olej (clonazepam skupiny – CLON)., Každé ošetření dostalo náhodné číslo a jak vyšetřovatel odpovědný za dávkování kapslí, tak dobrovolník nevěděli o jejich obsahu (dvojitě zaslepený). Nakonec byla volba intervalu mezi podáním léčiva a tpsrs založena na předchozích farmakologických studiích, které ukázaly, že maximální plazmatické koncentrace CBD a klonu užívané perorálně se obvykle vyskytují mezi 2 a 3 hodinami po požití (Agurell et al., 1981; Crevoisier et al., 2003; Borgwardt et al., 2008; Fusar-Poli et al., 2009; Martin-Santos et al., 2012)., CBD prochází významným účinkem prvního průchodu, což vede k tvorbě řady metabolitů a bylo zjištěno, že jeho poločas u lidí je mezi 2 a 5 dny po perorálním podání. Biologická dostupnost orálního CBD u lidí je kolem 6%, což podporuje názor, že má významný efekt prvního průchodu (Zhornitsky a Potvin, 2012). Průměrná plazmatická hladina CBD při 1, 2 a 3 h po akutním podání 600 mg byla 0, 36, 1, 62 a 3, 4 ng/ml (Martin-Santos et al., 2012)., Výběr dávek použitých v této studii byl založen na předchozích důkazech, které ukazují, že akutní Perorální podání 300 mg CBD mělo anxiolytické účinky v SPST (Zuardi et al., 1993).

Psychologické Měření

Dva faktory Vizuální Analogové Náladu Měřítku (VAMS), přeložen a ověřen do portugalštiny Zuardi a Karniol (1981), byly použity pro vyhodnocení úrovně úzkosti a uklidňující účinky v průběhu zkoušky. Vas je samoobslužný nástroj sestávající ze 16 položek. Před TPSRS, každý dobrovolník podstoupil školení k dokončení stupnice., Subjekty byly požádány, aby označily bod, který identifikoval jeho současný subjektivní stav na přímce 100 mm umístěné mezi dvěma slovy, která popisují opačné stavy nálady(např. Faktoriální analýza portugalské verze stupnice identifikovala čtyři faktory (Zuardi et al.,, 1993): (1) „úzkost“, zahrnující položky v klidu–vzrušený, uvolněný–napjatý a klidný–ustaraný; (2) „sedace“, včetně položek alert–ospalý a pozorný–zasněný; (3) „kognitivní porucha“, včetně quick-witted–mentálně pomalý, zdatný–nekompetentní, energický–letargický, s jasnou hlavou-muzzy, gregarious–stažený, dobře koordinovaný–nemotorný a silný-slabý; a (4) „nepohodlí“, “ včetně položek, které se zajímají–znuděný, šťastný–smutný, spokojený–nespokojený a přátelský–antagonistický (Parente et al., 2005). Od předchozích studií s oběma anxiogenními (Crippa et al., 2004; Parente et al.,, 2005) a anxiolytické léky včetně CBD (Crippa et al., 2004, 2011; Bergamaschi et al., 2011a) ukázaly, že pouze úzkost a sedace faktory přítomny změny během mluvení na veřejnosti úkolů, použili jsme pouze položky, které z těchto faktorů VAMS snížit administrativní čas a umožnit provedení protokolu. Tento postup byl dříve použit ve validační studii PSRST (Zuardi et al., 2013).

Fyziologické Měření

Systolický krevní tlak, DBP, a srdeční frekvence (HR) byly měřeny s digitální tlakoměr (Omron, Brazílie).,

test veřejného mluvení v reálné situaci (TPSRS)

v tomto postupu musí každý subjekt mluvit před skupinou a ve stejné experimentální relaci se účastnit publika, když mluví ostatní členové skupiny. Publikum je instruováno, aby během projevů mlčelo as neutrálním výrazem.

bylo provedeno pět experimentálních sezení s 12 subjekty (kromě 1, které zahrnovaly 11 subjektů). Na začátku zasedání byli dobrovolníci informováni o počtu léčby, kterou obdrží (jak je uvedeno výše)., Dobrovolníci byli poté instruováni, aby obsadili místa označená jejich příslušnými čísly léčby. Sedadla byla očíslována tak, že na konci pěti zasedání obsadili subjekty každé léčebné skupiny všechny možné pozice. Sekvence postupů vždy sledovala stejné pořadí od prvního do dvanáctého křesla ve snaze minimalizovat možný účinek pořadí v pořadí reproduktorů., Například, předměty v CBD-300 skupině obsadili následující pozice: první sezení – 3, 8; druhé zasedání – 4, 9; třetí sezení – 5, 10, čtvrté zasedání – 1, 6, 11, páté zasedání – 2, 7, 12.

Postup

Dobrovolníci začala experimentální sezení po alespoň 6 hodin spánku a 2 h po jídle standardní snídaní (200 ml čokoládového mléka a 100 g chleba s margarínem).,

12 dobrovolníků sedělo v židlích uspořádaných v půlkruhu, po předem stanoveném pořadí podle čísla léčby přiřazeného každému z nich a provedlo základní měření, následované příjmem pěti tobolek v intervalu 5 minut pro každého dobrovolníka. Tato fáze byla dokončena po dobu 1 h. dobrovolníci pak sledovali film o ptácích Amazonského lesa trvající asi 20 min. Poté se měření opakovala s intervalem 5 min pro každý subjekt (předběžné opatření)., 2 h a 20 min poté, co první dobrovolník dostal léčbu, všichni sledovali video trvající asi 10 min se zaznamenanými pokyny pro řečový test. 2 hodiny a 30 minut poté, co první dobrovolník obdržel léčbu, začali provádět řečový test, který trval 5 minut. Následně byli ostatní dobrovolníci podrobeni řečovému testu ve stejném pořadí, v jakém byli léčeni., Řeč test se skládal z tiše připravuje 1-min řeči na téma týkající se „podmínky jedné veřejné služby vašeho města,“ vybráno náhodou z 12 možností, a odhalil okamžitě, před řeči přípravy. Připravený projev byl poté prezentován na 2 min, přičemž ostatní účastníci a vyšetřovatelé sloužili jako publikum. Řeč byla přerušena v polovině měření., Sekvence postupů v této fázi byla následující: (A) sezení na židli uspořádané před ostatními; (b) výběr řečového tématu; (c) přemýšlení o tématu po dobu 1 min; (d) zahájení řeči, která byla přerušena po 1 min; (e) dokončení stupnice sebehodnocení (faktory úzkosti a sedace vas) a fyziologická měření; (f) pokračování řeči další minutu. Tato sekvence trvala maximálně 5 minut, takže po 1 hodině všichni dobrovolníci prošli postupem. Konečná fáze studie začala 216 min poté, co první dobrovolník vzal drogu., Všechna měření byla opakována a udržovala 5minutový interval pro každého dobrovolníka. Tabulka 1 představuje nástin experimentálního postupu.